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紫外分光光度仪常见使用问题分析(二)
  • 发布日期:2019-04-09      浏览次数:101
    •   紫外分光光度仪常见使用问题分析(二)
        故障:紫外分光光度仪没有任何检测信号输出
        原因:没有任何光束照射到样品室内。
        检查:将波长设定为530nm,狭缝尽量开到最宽档位,在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处,观察白纸上有无绿光斑影像。
        处置:检查光源镜是否转到位,双光束仪器的切光电机是否转动了(耳朵可以听见电机转动的声音)。
        故障:长时间段的负值或满屏大噪声
        具体表现:做基线扫描或样品扫描时,基线或信号有一个长时间段的负值或满屏大噪声
        原因:滤光片饲服电机“失步”,造成档位错位,国产电机尤甚。
        检查:重新开机有可能回复,或打开单色器对照波长与滤光片的相对位置来检查(注意:打开单色器时要保护检测器不被强光刺激)。
        处置:更换饲服电机;
        故障:吸光值信号上下摆动
        具体表现:当仪器波长固定在某个波长下时,吸光值信号上下摆动,特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。
        原因:开关触点因长期氧化所致造成接触不良。
        检查:用手加重力量按琴键时,吸光值随之变化。
        处置:用金属活化剂清洗按键触点即可。
        故障:紫外分光光度仪噪声较大
        具体原因:样品室放入空白后做基线记忆,噪声较大,紫外区尤甚。
        原因:比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈,使放大器超出了校正范围。
        检查:将波长设定为250nm,先在不放任何物品的状态下调零,然后将空比色皿插入样品道一侧,此时吸光值应小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿;同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小。
        处置:更换比色皿;更换空白液
        紫外分光光度仪使用注意
        1.使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液管均应校正、洗净后使用。
        2.取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。
        3.供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。
        4.测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。
        5.供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
        6.选用紫外分光光度仪的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。
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